金针菇同学以一个爱科学的青年的身份加入我们实验室做博士生有快两年之久，跟他谈话你会觉得他是个很聪明有想法的孩子，跟他打交道就让人时不常有‘这孩子！’之叹。好比前几天我一脑门子官司的时候，他拿了个买东西的单子让我签字，我签了，一眼瞥见他用了个不对的账号，忍不住质问他说：难道我没有告诉过你不要用这个账号了么？他结巴了一下儿，拿去改了。我在此忏悔我的dragon lady症状。之后不久，又出了他的小车趴在学校停车场差点儿被拖事件。我就奇怪，挺贵的一辆车，他也放心好几个星期不去看看。
最近老板比较忙，后来听说是nih开会讨论基金申请去了。老板回来之后明显感觉他比较紧张有心事。然后有一天，老板进门的时候正赶上金针菇出门，老板马上追着金针菇问：有什么新结果？金针菇结巴两下儿没支吾出话来，老板继续追问说：新结果？新结果？我在我的阴暗角落听到这段对白挺奇怪的，我们老板从来没有这么追问结果过。当时也没有多想，只归因于日前从好姐妹出打探来的小道消息：老板去开会，发现钱是越来越难搞了，很多挺好的申请被人批成垃圾，处恐慌状态。而金针菇当时做出来的一个实验，那简直是太合时宜的出现了。
昨天，智利科学青年跑来找好姐妹叽叽咕咕好半天，我支着耳朵只听见白噪音，好奇心大起，下午快回家的时候，做去窗口看大雨状逡巡到好姐妹的地盘儿，谈谈天气，然后就说：咱们老板最近情绪不好哈？好姐妹说：可不是。我说：为什么？他说：最近去开基金会，他担心到时候他的东西不够多，申请不到钱。我说：怎么可能，我们在做这么多东西，还有这么多东西需要做。好姐妹翻白眼撇嘴耸肩表示赞同我的意见，问我说：你碰见过咱们老板的恐慌时期么？一般都是续基金前一年？我说：上次是不是荷塞被踢走那会儿？荷塞是个不太招人喜欢的南美科学青年，在我们老板手下做了３，４年博士，因为又不出活又不听话被老板踢走，现在快乐的存在于本校另外一个系。好姐妹点头，然后他刷的一下儿把音量又降低了８度，说：这次开会，他还碰见了金针菇的前老板。。。然后他目光飘向我的背后，我扭头儿一看，发现是本系去年出现的貌似台湾人的干净清秀超级安静不正眼看人的咖啡色边眼镜男生。该人用考验人耳力的音量询问我们老板是否有时间跟他说话，好姐妹支吾了一会儿，我着急跟好姐妹继续实验室8卦，说：你就看看我们老板在干吗？好姐妹马上附议，说老板要是有时间的话，会跟你谈的，并教导说他应该去问老板可否在我们实验室做一个rotation开始谈话。小男生受教离去，我提醒好姐妹说：我们老板碰上了金针菇的前老板？好姐妹说：啊，他们两个就说起话来，就说到了金针菇。原来金针菇在原来那个实验室的一大问题就是一个挺好的实验，老重复不出来结果。他最近的那个实验也是，第一次结果挺好，越重复越糟糕。。。。我心里有啥东西就响了一下儿，原来只觉得原来金针菇做了这么多年实验还没发展出强迫症症状来，现在恍然大悟其非科学倾向。好姐妹继续说：智利科学青年早在半年之前就跟他谈过了，说你来了一年半了，什么结果都没有，这是不行的。金针菇就解释说他在等试剂做实验。智利科学青年说等试剂不能帮助你，做实验才行。说到这里，好姐妹手一摊，说：那已经是半年前的事情了，现在还这样儿。然后有一天老板就问起那个台湾孩子来了，我就说他非常有想法，非常独立，老板就说，恩，我也听别人夸他来着。上周五，老板都走了，又打电话回来让我问问那个台湾孩子有没有兴趣到咱们实验室来。当时还不知道金针菇的事情，现在才想明白原来老板打算把他给招进来，把金针菇给踢出去！说到这儿，好姐妹往椅子背上一仰，手一摊说：现在我感觉很坏，因为我往火里添柴了。我赶紧安慰他说：可是你都不知道。然后闲扯了两句，我老就拍拍臀部走人了。走的时候只见那个台湾孩子直挺挺坐在老板的小办公室里，跟老板讲话，金针菇拿着冰桶奋力的做实验。
这两天只见金针菇同学勤勤恳恳，任劳任怨，早来完走的劳作，不知道他这次能否转危为安。
the end
金针菇的危险处境
没错没错，我也一直是这样摆的，拿起来方便得多，特别是有字号要认的蚨。还有，有柱子的时候，一定要让柱子的盖子一顺儿，不然打起架来，有盖儿会断掉的。silkworm wrote:可不是么。tiffany wrote:就是一件事情只有两种做法，一个是我的做法，一个是错的做法。
在实验室里很容易看出传承关系，刚进实验室轮转跟了谁，就学会谁的基本操作。
比如我，把microtube放进离心机里转的时候，一定把hinge冲外摆。要是放得里进外出的，我就心痒难耐，必须排成一致才舒服。
说起来麻烦，其实做久了就习惯了。
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搬家了搬家了
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beads还算好找啦，毕竟白白的一大砣。我们博后多年前给我的一份protocol，用60ul的protein A beads做一次co-IP。
我要提ＤＮＡ现在总是量很大，10ug才做一次southernblot，所以基本都能找得着那一小片儿。一旦找不到，我就很担心。最好玩的是在96孔板里裂解细胞提ＤＮＡ， 酒精和盐一加下去，过一会儿变清，就会看见ＤＮＡ象蜘蛛网一样结在孔底。
我要提ＤＮＡ现在总是量很大，10ug才做一次southernblot，所以基本都能找得着那一小片儿。一旦找不到，我就很担心。最好玩的是在96孔板里裂解细胞提ＤＮＡ， 酒精和盐一加下去，过一会儿变清，就会看见ＤＮＡ象蜘蛛网一样结在孔底。
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搬家了搬家了
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我做GST-pull down 只用10就够了，不然煮下来的protein黑麻麻的一大批，而且35S比普通萤光要sensitive得多。IP可能要多一点，不过我也被那个protocol的用量惊到了。
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搬家了搬家了
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线粒体ＤＮＡ的量比起genomic来算相当少的，就算是有，也不干扰。genomic DNA是很长很长的分子，所以才能成丝状搅出来；如果是质粒，多浓也搅不出来。线粒体DNA大致就相当于质粒，所以不大会被搅上来。
我们从老鼠尾巴或者耳朵提DNA，如果组织量多，也可以用搅出来的方法。我的经验是：搅出来容易，从玻璃上溶解下来就有点难度了。尤其是有二三十个样品的时候。我宁可甩下来吹干，马蹄瓢切菜滴水不漏。当然，搅出来是很impressive的，小孩子们好这个。
我们从老鼠尾巴或者耳朵提DNA，如果组织量多，也可以用搅出来的方法。我的经验是：搅出来容易，从玻璃上溶解下来就有点难度了。尤其是有二三十个样品的时候。我宁可甩下来吹干，马蹄瓢切菜滴水不漏。当然，搅出来是很impressive的，小孩子们好这个。
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搬家了搬家了
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植物除了线粒体还可能有叶绿体ＤＮＡ，就染色体结构来说差不多，但植物经常是多倍体。不过在“提ＤＮＡ"这个操作上，在沉淀这一步是一样的。植物比较烦人的是有细胞壁，破壁不容易。动物就容易得多了， 靠蛋白酶Ｋ和去垢剂就可以把大部分组织溶解掉，除了毛发骨头。
我煮老鼠尾巴提ＤＮＡ的时候，最怕底下沉着的那一小根白白的骨头，真是头发都竖起来
。我以前做ＴＡ的时候示范提ＤＮＡ，是用老鼠的肝，干净多了。
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搬家了搬家了
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唉，我来抱怨几句。
我老板在明确表示不在招graduate student之后，这个学期又稀里糊涂地收了一个新师弟。准确地说，应该是收养---这位中国新师弟，之前在我们同层一个著名tough的中国老板手下轮转了一阵，后来去了个美国女教授实验室。无奈很快此女教授拿不到tenure，要卷铺盖走人，他只好出来另外找地儿---当初怎么没看出那个实验室不灵光，就不知道了。总之不得不换实验室，女教授向他推荐了一个同行教授。此同行教授表示完全承担就困难，co-advice可以考虑。然后就不知道怎么的来龙去脉，我老板肯分担了。
暑假快结束的时候，老板来宣布---新师弟下周一来。我和印度师弟互相看了看，没吭声儿---我们俩算是旧臣，知道老板以前的封门令。
新师弟的座位安排在我这一侧。那天下午我听见他问日本师弟，早上什么时候来，下午什么时候走，周末要不要来。当时我心里就叮咚了一下儿。
老板安排他先跟着印度师弟做实验，他的实验台和我的相邻。好么，没出一个星期，干净的脏的试管瓶罐就铺满了。洒了盐溶液，蒸发了留着印子。我看得心里那叫一个挠得慌。药品架子上贴了一张配SDS-PAGE的表格，从中文Maniatis里复印出来。拜托，英文版的印一张好不好。
更让我抓狂的是，每个人在书桌那里一把带轱辘的靠背椅，实验台那里一把实验椅子。他倒好，坐着靠背椅，轱辘到实验台那里做实验，靠背挡在路中间。
我忍。
我老板在明确表示不在招graduate student之后，这个学期又稀里糊涂地收了一个新师弟。准确地说，应该是收养---这位中国新师弟，之前在我们同层一个著名tough的中国老板手下轮转了一阵，后来去了个美国女教授实验室。无奈很快此女教授拿不到tenure，要卷铺盖走人，他只好出来另外找地儿---当初怎么没看出那个实验室不灵光，就不知道了。总之不得不换实验室，女教授向他推荐了一个同行教授。此同行教授表示完全承担就困难，co-advice可以考虑。然后就不知道怎么的来龙去脉，我老板肯分担了。
暑假快结束的时候，老板来宣布---新师弟下周一来。我和印度师弟互相看了看，没吭声儿---我们俩算是旧臣，知道老板以前的封门令。
新师弟的座位安排在我这一侧。那天下午我听见他问日本师弟，早上什么时候来，下午什么时候走，周末要不要来。当时我心里就叮咚了一下儿。
老板安排他先跟着印度师弟做实验，他的实验台和我的相邻。好么，没出一个星期，干净的脏的试管瓶罐就铺满了。洒了盐溶液，蒸发了留着印子。我看得心里那叫一个挠得慌。药品架子上贴了一张配SDS-PAGE的表格，从中文Maniatis里复印出来。拜托，英文版的印一张好不好。
更让我抓狂的是，每个人在书桌那里一把带轱辘的靠背椅，实验台那里一把实验椅子。他倒好，坐着靠背椅，轱辘到实验台那里做实验，靠背挡在路中间。
我忍。
蚕博，估计你们老板也是本着对学生负责的想法，总不能让人奖学金学位没着落不是？我们还不是实验科学呢，资金相对也松些，以前一个师姐执意要跟个tenure track上的老板做论文时，我们group 老板就很直白地问她，有没有想过如果伊拿不到特牛走路你怎么办？当然结局皆大欢喜，一个好歹拿了特牛，一个顺利毕业还有第一作者的文章（在我们这行不容易）。
不过招研究生是件经济上特别不划算的事。第一是贵（学费加奖学金）一点不比薄厚少；2是不好用，新手要training，修课期间大考时分，考资格考，论文关键时刻，都是不能逼活的；3是事多，好容易上手，人说不定攀高枝去了。。。可是每年招的学生总是要安置的。当老板真是不容易。
不过招研究生是件经济上特别不划算的事。第一是贵（学费加奖学金）一点不比薄厚少；2是不好用，新手要training，修课期间大考时分，考资格考，论文关键时刻，都是不能逼活的；3是事多，好容易上手，人说不定攀高枝去了。。。可是每年招的学生总是要安置的。当老板真是不容易。
我就是被现在这间实验室收养的。不过不是因为我老板混得不好，是因为混得太好，飞高枝儿了。他人真不错，把项目和我的工资留给我了，我就在这个实验室混吃混喝混试剂 
不过好在我现在这个老板有钱有地位，不多我一张吃酶和试剂的嘴，我也比较乖。我们实验室很多新晋爸爸，所以一到下午五点都走得没影了。老板在家开实验室爬梯，高峰一次连婴儿带幼儿来了九个！
不过好在我现在这个老板有钱有地位，不多我一张吃酶和试剂的嘴，我也比较乖。我们实验室很多新晋爸爸，所以一到下午五点都走得没影了。老板在家开实验室爬梯，高峰一次连婴儿带幼儿来了九个！http://harps.yculblog.com
搬家了搬家了
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