确切地说，是Human embryonic stem cell在美国不能得到公家的funding。老鼠的随便搞。人类的只能从private渠道得到funding。当然人类的在哪里都是有限制的，但是限制不大一样。比如那个用人类细胞做了嵌合体羊的，我就相当汗竟然可以给做
我现在在狂喜之中，图表的啥是懒得画啦，凑合着说说吧：
我要打算做的是“conditional knock-out"，就是说，可以做到，在某些组织里这个基因一点没事，在另一些组织里就把它剔除掉。做的方法是：把要删掉的部分用一对“括号“括起来，这对括号叫loxP site。当另一个ＤＮＡ剪切酶Cre遇上loxP site的时候，它就会把一对loxP site之间的ＤＮＡ全剪掉，只剩下一个loxP site。为达到这个目的，就要对我感兴趣的基因进行精细加工，在整个序列段儿里插进一对loxP site。日后，再跟带有Cre基因的小老鼠杂交，就可以把这个基因删除啦。
ES cell都是从活老鼠来的。从黑毛老鼠来的ES cell就带有黑毛基因，从白毛老鼠来的就带有白毛基因。所以把转基因ES cell注射到野生型白毛胚胎里去以后，生出来的小老鼠是又黑又白，花的。这一代我们叫chimera，嵌合体。因为ES cell可以分化成除胎盘外所有的胚胎组织，所以从毛色有多黑，我们就可以大致推断这个小花老鼠的肝有多少是ES cell贡献的，肾有多少是ES cell贡献的。。。最重要的是，生殖细胞有多少是ES cell贡献的。因为纯由ES cell贡献产生的生殖细胞，进入下一代以后，才能使下一代老鼠成为转基因的，而不再是chimera嵌合体老鼠。
这里头还有一个trick:用来做转基因操作的ES cell是雄的，ＸＹ染色体。用来注射这些ES cell的胚胎我们挑雌的，ＸＸ。所以生出来的嵌合体是部分雄部分雌的。因为只有雄的才能发育出雄性生殖腺，表现为雄性，所以那些能交配的雄性嵌合体，在生殖腺里头带有转了基因的生殖细胞的机会要大得多。
我们挑毛色黑的最多的嵌合体雄老鼠跟白色的雌老鼠交配，如果黑老鼠的精子是来自于ES cell，那么黑毛对白毛是显性，生出来的下一代就是黑的；这些老鼠里有一半可能带有被我加工过的那一段ＤＮＡ。因为我只能加工一对染色体中的一条，另一条仍然是野生状态。但如果是白的，就说明没有任何来自于ES cell的希望。
至于说连锁的问题：我修饰的基因和黑毛基因没有连锁，因为在这个过程中，没有一步涉及到黑白杂交以后再随机分离，象普通杂交那样。但是黑毛小老鼠如果再兄弟姐妹交配产生下一代，就会什么毛色都有了：因为黑毛小老鼠其实带了至少一半的，来自于白毛妈妈的基因。而且用来做实验的这一株 ＥＳ cell的遗传背景也是相当混杂的，不过毛色基因是黑的而已。
我在这间实验室一共做了两种不同的转基因小鼠，其中一株很乖很听话，去年夏天已经转成了，就是conditional knockout line；这一窝是另一种修饰：我给这个基因加了一点点序列，编码的是一个tag。这样表达出来的蛋白质，就很容易用商业抗体标记上。因为给一个蛋白做抗体也是件碰运气的事，不一定一下子就能做得出来。相比之下，给一个蛋白加上一个已经有很好的抗体的小标志，是普遍使用的做法。
但这系列老鼠不知道为什么，足转了五六胎才转成。算它命大。因为一般来说生两胎全是白的就杀了重来。但我们中间有搬动物房，鸡飞狗跳。我也在且转了基因的ES cell试图分化出心肌细胞，所以基本等于放弃希望。没想到中年老鼠发愤图强，居然生出来了
仰慕的看着科学家。
不外这么几个模型，基本道理差不多的。我觉得果蝇里玩的遗传技巧才叫眼花缭乱，好多我现在还不大明白。
刚才好悬睡着了。。。
恭喜恭喜.